ABSTRACT Background: American cutaneous leishmaniasis is a commonly neglected, vector-borne tropical parasitic disease that is a major public health concern in Brazil. Leishmania (Viannia) braziliensis is the main species associated with the disease. Accurate diagnosis is based on epidemiological surveillance, clinical assessment, and laboratory testing. Leishmania (V.) braziliensis has been detected in several wild and synanthropic mammals. Their epidemiological role has not been entirely elucidated. This study aimed to assess potential L. braziliensis infections in asymptomatic domestic animals, by molecular and serological testing in endemic areas, in the metropolitan region of Recife. Methods: Blood samples and conjunctival fluids were collected from 232 animals (canids, felids, equines, and caprines) for the detection of L. braziliensis using molecular tests (conventional and real-time polymerase chain reaction [PCR and qPCR]). For immunological detection, blood samples from 115 dogs were assessed using enzyme-linked immunosorbent assay. Results: Real-time quantitative PCR showed positive results for blood and conjunctival samples in all investigated species. The results of the blood and conjunctival samples were 68.2% and 26.9% in Canis familiaris, 100% and 41.7% in Felis catus, 77.3% and 30.8% in Equus caballus/Equus asinus, and 50% and 33.3% in Capra hircus samples, respectively. Conclusions: Results from this study adds valuable information to our understanding of the role of asymptomatic domestic animals, L. braziliensis life cycle, and American cutaneous leishmaniasis in Northeast Brazil.

Resumo Flebotomíneos do gênero Lutzomyia são importantes vetores de espécies de Leishmania, agente etiológico das leishmanioses. O objetivo deste estudo foi avaliar a diversidade de flebotomíneos em área endêmica para Leishmaniose Visceral (LV). As coletas foram realizadas em quatro localidades do litoral do município de Goiana, Pernambuco, Nordeste do Brasil. Os espécimes foram coletados mensalmente em três noites consecutivas de novembro de 2017 a outubro de 2018. Foram instaladas armadilhas luminosas modelo CDC a uma altura de 1,5 m acima do solo em dois ecótopos (ex. árvore e instalações de animais), ambos em áreas peridomiciliares. Um total de 5.205 flebotomíneos foi coletado, sendo Lutzomyia longipalpis (99,85%; 5.197/5.205) a mais comum, seguida por Lutzomyia evandroi (0,13%; 07/5.205) e Lutzomyia whitmani (0,02%; 01/5.205). L. longipalpis foi coletada durante todo o período do estudo. A maioria dos espécimes foi detectada perto das instalações dos animais. Os achados deste estudo indicam a presença de vetores de Leishmania infantum na área avaliada ao longo do ano, bem como a ocorrência de vetores relacionados à Leishmaniose Cutânea (LC). Medidas preventivas de controle vetorial devem ser implementadas em Goiana para reduzir o risco de infecção à população humana e animal.

Abstract Phlebotomines of the genus Lutzomyia are important vector for species of Leishmania, the etiological agent of leishmaniasis. The aim of this study was to assess the diversity of sandflies in an endemic area for Visceral Leishmaniasis (VL). Sampling was performed in four localities on the coast of the municipality of Goiana, state of Pernambuco, Northeastern Brazil. Specimens were collected monthly on three consecutive nights, from November 2017 to October 2018. CDC light traps were installed at a height of 1.5 m above the ground, in two ecotypes (i.e. tree and animal facility), both in peridomestic areas. A total of 5,205 sandflies were collected, among which the species Lutzomyia longipalpis (99.85%; 5,197/5,205) was the most common, followed by Lutzomyia evandroi (0.13%; 07/5,205) and Lutzomyia whitmani (0.02%; 01/5,205). Specimens of L. longipalpis were collected throughout the study period and most of them were found near to the animal facilities. The findings from this research indicate that vectors for Leishmania infantum are present in the study area throughout the year, along with occurrences of vectors relating to Cutaneous Leishmaniasis (CL). Preventive vector control measures need to be implemented in Goiana to reduce the risk of infection for the human and animal populations.

Vários flebotomíneos têm sido considerados como possíveis vetores suspeitos ou comprovados de parasitas do gênero Leishmania no Brasil, mas os dados para região nordeste continuam incipientes. Neste estudo, 600 flebotomíneos foram agrupados em grupos de 10 espécimes e testados por uma PCR específica para o gênero Leishmania e por outra PCR para Leishmania (Leishmania) infantum. Quatorze dos 60 grupos foram positivos por PCR gênero-específica, sendo cinco de L. migonei, sete L. complexa, um de L. sordellii e um de L. naftalekatzi, o que corresponde a uma taxa mínima de infecção de 2,3% (14/600). Nossos resultados, associados à antropofilia e abundância dessas espécies, sugerem a participação de L. migonei e L. complexa como vetores de Leishmania no nordeste do Brasil. Notavelmente, a detecção de DNA de Leishmania em L. sordellii e L. naftalekatzi é relatada pela primeira vez no Brasil, mas futuros estudos são necessários para compreender melhor o significado desses achados.

Several phlebotomine sand fly species have been regarded as putative or proven vectors of parasites of the genus Leishmania in Brazil, but data for the northeastern region remains incipient. In this study, a total of 600 phlebotomine sand flies were grouped in pools of 10 specimens each and tested by a Leishmania genus-specific PCR and by a PCR targeting Leishmania (Leishmania) infantum. Fourteen out of 60 pools were positive by the genus-specific PCR, being five pools of L. migonei, seven of L. complexa, one of L. sordellii and one of L. naftalekatzi, which correspond to a minimal infection rate of 2.3% (14/600). Our results, associated with their known anthropophily and their abundance, suggest the participation of L. migonei and L. complexa as vectors of Leishmania in northeastern Brazil. Remarkably, this is the first time in this country that the detection of Leishmania DNA in L. sordellii and L. naftalekatzi has been reported, but future studies are necessary to better understand the significance of these findings.

INTRODUÇÃO: Nas últimas décadas tem se observado uma considerável expansão geográfica das leishmanioses em todas as regiões do Brasil. O presente estudo foi realizado para identificar a fauna de flebotomíneos e verificar a sazonalidade das principais espécies após mudanças ambientais ocorridas no município de São Vicente Férrer, Estado de Pernambuco, Brasil. MÉTODOS: As capturas foram realizadas durante quatro noites consecutivas por mês usando armadilhas luminosas CDC, no período de setembro de 2009 a setembro de 2010. A correlação entre o número de flebotomíneos capturados e fatores climáticos (temperatura e umidade) foi avaliada. RESULTADOS: Foi capturado um total de 13.872 espécimes pertencentes a 20 espécies, sendo 6.247 (45%) fêmeas e 7.625 (55%) machos. Lutzomyia migonei foi a espécie mais abundante com 9.964 (71,8%) espécimes, sendo predominante no intradomicílio 108 (86,4%) e peridomicílio 9.746 (97%). Nos resquícios de mata primária, predominaram Lutzomyia complexa 2.395 (65%) e Lutzomyia sordellii 770 (20,8%). A análise de correlação entre o número total de flebotomíneos capturados e os fatores climáticos não mostrou uma influência significativa na densidade da população. CONCLUSÕES: A elevada abundância de Lutzomyia migonei e Lutzomyia complexa indica a possibilidade de novos casos de leishmaniose cutânea (LC).

INTRODUCTION: In the last decades, a considerable geographic expansion of the leishmaniases in all regions of Brazil has been observed. The present study was carried out to identify the composition of the phlebotomine sandfly fauna and verify the seasonal variation of the main species after environmental changes occurred in São Vicente Férrer Municipality, State of Pernambuco, Brazil. METHODS: Captures were carried out during four consecutive nights of each month using Centers for Disease Control and Prevention light traps from September 2009 to September 2010. The correlation between the number of phlebotomine sandflies captured and climatic factors (temperature and rainfall) was evaluated. RESULTS: A total of 13,872 specimens belonging to 20 species were captured, of which, 6,247 (45%) were females, and 7,625 (55%) were males. Lutzomyia migonei was the most abundant species with 9,964 (71.8%) specimens, being predominant in the intradomicile and peridomicile areas with 108 (86.4%) and 9,746 (97%), respectively. In the forest remnants, Lutzomyia complexa 2,395 (65%) and Lutzomyia sordellii 770 (20.8%) predominated. The correlation analysis between the total number of sandflies captured and climatic factors did not show a significant influence on population density. CONCLUSIONS: The high abundance of Lutzomyia migonei and Lutzomyia complexa indicates the possibility of new cases of cutaneous leishmaniasis (CL).

O Programa Nacional de Controle da Raiva Humana do Ministério da Saúde preconiza o esquema profilático pré-exposição (PEP) para profissionais envolvidos com animais expostos ao risco de contraírem raiva. O presente trabalho relata o diagnóstico de raiva (ante e post-mortem) em veterinário infectado por manipulação de herbívoros raivosos. O diagnóstico laboratorial ante-mortem foi efetuado a partir da saliva e biópsia de folículo piloso, utilizando técnicas de biologia molecular e o post-mortem a partir do tecido cerebral e de técnicas convencionais. O médico veterinário coletou amostras para diagnóstico de raiva em herbívoros (bovinos e caprinos) suspeitos que, posteriormente, foram confirmados positivos em laboratório. Após a apresentação dos sintomas clássicos de raiva e realizadas as provas de diagnóstico ante-mortem com saliva e folículo piloso, ambas as amostras apresentaram resultados positivos pelo nested-RT-PCR. O sequenciamento genético revelou que a infecção se deu pela variante 3 do Desmodus rotundus, resultados estes confirmados com a amostra do cérebro. É indispensável que profissionais expostos ao risco de infecção pelo vírus da raiva realizem a profilaxia pré-exposição. Ressalta-se, também, que as técnicas de biologia molecular apresentaram bons resultados para a realização de diagnóstico ante-mortem, propiciando o desenvolvimento de métodos terapêuticos, e determinando com precisão e rapidez a fonte de infecção dos casos de raiva humana.

The Ministry of Health's National Human Rabies Control Program advocates pre-exposure prophylaxis (PEP) for professionals involved with animals that are at risk of contracting rabies. We report an antemortem and postmortem diagnosis of rabies in a veterinarian who became infected when handling herbivores with rabies. The antemortem diagnosis was carried out with a saliva sample and a biopsy of hair follicles using molecular biology techniques, while the postmortem diagnosis used a brain sample and conventional techniques. The veterinarian had collected samples to diagnose rabies in suspect herbivores (bovines and caprines) that were subsequently confirmed to be positive in laboratory tests. After onset of classic rabies symptoms, saliva and hair follicles were collected and used for antemortem diagnostic tests and found to be positive by RT-PCR. Genetic sequencing showed that the infection was caused by variant 3 (Desmodus rotundus), a finding confirmed by tests on the brain sample. It is essential that professionals who are at risk of infection by the rabies virus undergo pre-exposure prophylaxis. This study also confirms that molecular biology techniques were used successfully for antemortem diagnosis and therefore not only allow therapeutic methods to be developed, but also enable the source of infection in human rabies cases to be identified accurately and quickly.

Este estudo teve como objetivo identificar a fauna de flebotomíneos envolvida em área de incidência de leishmaniose visceral americana no Município de São Vicente Férrer, localizado na Zona da Mata de Pernambuco, Brasil. Capturas de flebotomíneos foram realizadas mensalmente durante quatro noites, entre dezembro de 2002 e novembro de 2003, através de capturas manuais com auxílio da armadilha de Shannon e armadilhas luminosas modelo CDC. O total de 23.156 exemplares de flebotomíneos foi coletado em resquícios de Mata Atlântica, casas e abrigos de animais. Lutzomyia complexa apresentou predominância de 62,5% (14.445/23.156), seguida por Lutzomyia migonei, 33,2% (7.677/23.156). Lutzomyia longipalpis, principal vetor de Leishmania chagasi no Brasil e nas Américas, não foi encontrado nesta região. Alguns exemplares foram dissecados para a pesquisa de infecção natural, mas não foram detectadas formas características de Leishmania.

The aim of this study was to identify the fauna of phlebotomine sandflies in an area with incidence of American visceral leishmaniasis (AVL) in São Vicente Férrer, a municipality (county) located in the northern Zona da Mata in Pernambuco State, Brazil. Sandfly captures were conducted monthly for four nights/month from December 2002 to November 2003, by means of manual captures (with a Shannon trap) and by CDC light traps. A total of 23,156 specimens of phlebotomines sandflies were collected in a remnant of the Atlantic rainforest, houses, and animal shelters. Lutzomyia complexa was the most prevalent species, with a frequency of 62.5% (14,445/23,156), followed by Lutzomyia migonei, with 33.2% (7,677/23,156). No Lutzomyia longipalpis (the main vector of Leishmania chagasi in Brazil and the Americas) was found in the target area. Some specimens were dissected, but no Leishmania parasites were found.

Este estudo teve como objetivo identificar a fauna de flebotomíneos envolvida em área de incidência de leishmaniose visceral americana no Município de São Vicente Férrer, localizado na Zona da Mata de Pernambuco, Brasil. Capturas de flebotomíneos foram realizadas mensalmente durante quatro noites, entre dezembro de 2002 e novembro de 2003, através de capturas manuais com auxílio da armadilha de Shannon e armadilhas luminosas modelo CDC. O total de 23.156 exemplares de flebotomíneos foi coletado em resquícios de Mata Atlântica, casas e abrigos de animais. Lutzomyia complexa apresentou predominância de 62,5% (14.445/23.156), seguida por Lutzomyia migonei, 33,2% (7.677/23.156). Lutzomyia longipalpis, principal vetor de Leishmania chagasi no Brasil e nas Américas, não foi encontrado nesta região. Alguns exemplares foram dissecados para a pesquisa de infecção natural, mas não foram detectadas formas características de Leishmania.

The aim of this study was to identify the fauna of phlebotomine sandflies in an area with incidence of American visceral leishmaniasis (AVL) in São Vicente Férrer, a municipality (county) located in the northern Zona da Mata in Pernambuco State, Brazil. Sandfly captures were conducted monthly for four nights/month from December 2002 to November 2003, by means of manual captures (with a Shannon trap) and by CDC light traps. A total of 23,156 specimens of phlebotomines sandflies were collected in a remnant of the Atlantic rainforest, houses, and animal shelters. Lutzomyia complexa was the most prevalent species, with a frequency of 62.5% (14,445/23,156), followed by Lutzomyia migonei, with 33.2% (7,677/23,156). No Lutzomyia longipalpis (the main vector of Leishmania chagasi in Brazil and the Americas) was found in the target area. Some specimens were dissected, but no Leishmania parasites were found.